华南农业大学生命科学学院副教授胡宇飞课题组在国家自然科学重点基金等项目的资助下，在拟南芥中利用CRISPR/Cas9介导实现转移DNA（T-DNA）的高效定点插入，并开发出两种应用。近日，相关成果发表于《植物杂志》（Plant Journal）。
CRISPR/Cas9介导的T-DNA定点插入。研究团队供图
位点特异性DNA插入（site-specific DNA insertion）是作物育种和基因功能分析的重要工具，可以将功能性元件插入特定基因组位点，并可以避免插入基因在染色体不同位置所带来的表达差异。在过去几十年里，许多努力未能实现令人满意的效率。
传统的位点特异性DNA插入方法基于同源重组修复机制，然而，植物细胞中同源重组修复的低活性使得需要多个世代，筛选大量后代，因而低效。与同源重组修复介导的插入低效相比，农杆菌介导的T-DNA整合效率高，是植物遗传工程的主要手段。然而，T-DNA整合依赖非同源末端连接途径，在植物基因组中的插入位点具有随机性。
该研究开发了一种CRISPR/Cas9介导的拟南芥靶向T-DNA插入的方法。该方法比同源重组修复介导的方法更快速、高效，并以此开发了基因激活和雄性生殖细胞特异性基因标记两种应用。基因激活通过在T-DNA的LB端设置CaMV35S启动子，定点插入激活特定的下游基因。利用该技术实现了FT和MYB26的激活，显著增加了转录表达，分别导致早花和花药内壁次生壁增厚模式的改变。
雄性生殖细胞特异性基因标记的T-DNA中包含两个报告基因，即NeoR和MGH3::mCherry，有助于创建定点插入突变体，简化突变等位基因的遗传分析，并可对受精过程的生殖细胞进行活体追踪。该研究成功地将该系统应用于靶向精细胞特异表达，参与精卵识别的基因GEX2。
相关论文信息：https://doi.org/10.1111/tpj.70104
面对以大模型通用人工智能为代表的新技术，以及由此带来的工业界、产业界的新发展新模式，MBA人才教育何去何从？ 12月1日，在清 “太忙了。”这是清华大学人工智能（AI）国际治理研究院副院长梁正面对记者脱口而出的一句话。 去年11 大学校门要全面敞开吗？开放程度如何把握？ 近日，北京大学李植副教授发表文章《从今天与保安比赛跑步说起——北京大学的门卫 ·GLP-1类药物正在以令人兴奋和不安的方式重塑医学、流行文化，甚至全球股市。制药公司掀起一场“肥胖革命”，但 即使在新冠疫情期间接种了数十亿剂疫苗后，信使核糖核酸（mRNA）疫苗仍令人惊讶。近日，《自然》发表的一项研究表明，mRNA疫苗可 我国工程师领域又添了一个国家级的大奖。19日上午，“国家工程师奖”表彰大会在人民大会堂举行，81名个人被授予“国家 。本文链接：农杆菌T-DNA介导实现高效DNA定向插入http://www.sushuapos.com/show-11-19144-0.html
声明：本网站为非营利性网站，本网页内容由互联网博主自发贡献，不代表本站观点，本站不承担任何法律责任。天上不会到馅饼，请大家谨防诈骗！若有侵权等问题请及时与本网联系，我们将在第一时间删除处理。
上一篇： 新概念疫苗佐剂为疫苗技术“换芯”
下一篇： 水稻粒型研究获新进展